1911年4月，广州黄花岗起义失败，清政府开始大肆搜捕革命党人。海城作为广州通往内地的重要关卡，随着大批清廷密探的到来，也变得情势紧张起来。夏至上午，柳晚晴在海城医院得知自己怀孕。她欣喜地接通了丈夫谢志远的电话，可还没来得及说出这个喜讯，就被丈夫告知他要出差，然后匆匆挂了电话。当天午夜，两名警察匆匆敲开谢家的门，带来了谢志远遭遇车祸的噩耗。柳晚晴赶到医院，发现丈夫已经遇难身亡。更让她无法接受的是：与丈夫一同遭遇车祸的还有一位妙龄女子王心茹。从车上的行李和找到的两张船票来看，两个人显然是约好了私奔。在警察局，柳晚晴还遇到了为那个妙龄女子处理后事的男人，他叫萧枫，是王心茹的丈夫。萧枫告诉她：在整理遗物的过程中，发现了一把钥匙，沿着这个线索，他找到了谢志远和王心茹秘密幽会的旅馆。柳晚晴终于相信这个令人晴天霹雳的“事实”。也许是同命相怜，柳晚晴渐渐对正直温柔的萧枫产生了好感。可就在这个时候，柳晚晴发现了一件极其可疑的事情--萧枫向警察撒了谎，谢志远出车祸那天，萧枫并不是如他所说在家中养病，而是开车出了趟城。可他为什么要隐瞒呢？难道他和丈夫的死有什么牵连？怀着这些疑问，柳晚晴开始了自己的调查。她发现丈夫出事那辆汽车轮胎曾被子弹射穿，而萧枫抽屉里有一把手枪，弹夹中的子弹与射穿轮胎的子弹是同一型号。 萧枫向晚晴坦白：那次车祸不是意外。晚晴原谅了萧枫。隔日，柳晚晴身体不舒服，萧枫陪她去海城医院检查身体，在萧枫走后，柳晚晴顺便问了一下王心茹生前的情况。结果发现了一件更为可怕的事情：王心茹根本没有结过婚，更没有所谓的丈夫！柳晚晴开始悄悄跟踪萧枫，竟一路来到了谢志远和王心茹幽会过的旅馆。更让柳晚晴大吃一惊的是：那个在车祸中丧生的王心茹居然死而复生！萧枫和她约在旅馆见面，两个人似乎有着不可告人的秘密。萧枫和王心茹的真实身份究竟是谁？他们为什么要费尽心思接近柳晚晴？谢志远到底是生还是死？
描写的是一对孪生姊妹（胡蝶兼饰）的不同遭遇。妹妹二宝自幼跟随私贩洋枪的父亲逃往城市，长大以后被父亲送给了军阀钱督办做姨太太；姐姐大宝则和母亲（宣景琳饰）一起住在乡下，后来嫁给一个穷苦的木匠桃哥（郑小秋饰），父母姊妹不通音讯，彼此不知下落。十多年后，大宝夫妇和母亲从乡下流落到城市。桃哥去做工，大宝抛下未满月的孩子，到钱督办的公馆去当奶妈，她带的正好是二宝的孩子。二宝作为主妇，对大宝非常冷淡，甚至因为大宝外貌酷似自己而感到反感；大宝为了保住饭碗，只好尽心服侍小主人。一天，桃哥干活时摔伤，无钱医治，大宝便恳求二宝预支一点工钱，但二宝非但不肯，反而打了大宝一记耳光。大宝为了救治丈夫，便窃取了小主人的金锁片，不巧又被钱督办的妹妹撞见，大宝失手碰倒花瓶，致使钱妹遭误伤而亡，大宝即以杀人罪入狱。大宝入狱后，母亲前来探监，才发现主办大宝一案的军法处长正是遗弃自己多年的丈夫。丈夫在妻子的愤怒斥责和要求下，安排妻子和大宝、二宝会面。真相大白后，二宝终于为母亲和姐姐的苦难遭遇所感动，不顾父亲劝阻，带领她们驱车前往钱督办处求情。1934年，《姊妹花》被评选为最佳有声片；1935年，《姊妹花》曾和《渔光曲》等影片一起被推荐参加莫斯科电影节展映。
